Принцип процедуры – Инструкция по эксплуатации Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System
Страница 4
Pу
сский
Стр. 4 из 25
Pу
сский
Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Инструкции по эксплуатации TA9145 RU-CE-Rev_E 18/06/2013
Принцип процедуры
Bond Oracle HER2 IHC System содержит компоненты, необходимые для выполнения
процедуры иммуногистохимического окрашивания для тканей, фиксированных
формалином и пропитанных парафином. После инкубации с готовым к использованию
HER2 Primary Antibody (клон CB11), в этой системе применяется готовая к использованию
технология Compact Polymer. Энзиматическое преобразование добавляемого
впоследствии хромогена приводит к образованию видимого продукта реакции
при локализации антигенов. В этом случае участки ткани можно контрокрашивать,
обезвоживать, делать прозрачными и приготовлять для исследования. Результаты
интерпретируются с помощью световой микроскопии. Для валидации серий окрашивания
имеются контрольные предметные стекла с четырьмя фиксированными формалином
и пропитанными парафином колониями клеток рака груди. Четыре колонии клеток
демонстрируют выраженность онкогенного белка HER2 с интенсивностью 0, 1+, 2+ и 3+.
Интенсивность окрашивания этих колоний клеток соотносится и с рецепторной нагрузкой
онкогенного белка HER2 на каждую клетку, и состоянием усиления гена HER2.
Bond Oracle HER2 IHC System (код продукта TA9145) предназначен для использования
на полностью автоматизированной, улучшенной системе окрашивания Leica Biosystems
BOND.
Предоставляемые компоненты
Перечисленные ниже материалы (Taблица 1) достаточны для окрашивания
150 предметных стекол (60 исследуемых предметных стекол, инкубированных с HER2
Primary Antibody, 60 исследуемых предметных стекол, инкубированных с HER2 Negative
Control, 15 HER2 контрольных предметных стекол, инкубированных с HER2 Primary
Antibody и 15 внутрилабораторных анализов позитивной контроль-ткани, инкубированных
с HER2 Primary Antibody). Количество исследований основывается на автоматизированной
раздаче по 150 мкл на каждое предметное стекло. Материалов в комплекте достаточно
для 15 отдельных серий окрашивания BOND.
HER2 Контрольные
предметные стекла,
(x15)
Области фиксированных формалином и пропитанных парафином колоний клеток рака
груди, демонстрирующих выраженность онкогенного белка HER2 с интенсивностями
окрашивания 0, 1+, 2+ и 3+ при окрашивании в соответствии с прилагаемым
протоколом. Эти области полностью приклеиваются и не требуют дополнительного
спекания.
HER2 Primary
Antibody, 13,5 мл
Содержит готовое к использованию, аффинажно-очищенное мышиное моноклональное
антитело IgG, клон CB11 и 0,35% ProClin
™
950
.
HER2 Negative
Control, 9 мл
Содержит готовое к использованию мышиное антитело IgG в эквивалентной
концентрации к HER2 Primary Antibody и 0,35% ProClin
™
950.
Peroxide Block, 22,5 мл
Содержит 3–4% пероксид водорода.
Post Primary, 22,5 мл
Кроличье антимышиное IgG (<10 мкг/мл) в Tris-буферизованном соляном растворе с
содержанием 10% (v/v) животной сыворотки и 0,09% ProClin
TM
950.
Polymer, 22,5 мл
Poly-HRP козье антикроличье IgG (<25 мкг/мл) в Tris-буферизованном соляном растворе
с содержанием 10% (v/v) животной сыворотки и 0,09% ProClin
TM
950.
DAB Part 1, 2,25 мл
Содержит 66 мM 3,3’-диаминобензидинтетрагидрохлорида в стабилизирующем
растворе.
DAB Part B (x2), 22,5 мл
Содержит
≤0,1% (v/v) пероксида водорода.
Hematoxylin, 22,5 мл
Содержит <0,1% гематоксилина.
Таблица 1. Компоненты Bond Oracle HER2 IHC System