Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System - Инструкция (Страница 20)

Pу
сский
Стр. 20 из 25
Pу
сский
Leica Biosystems Bond Oracle HER2 IHC System Инструкции по эксплуатации TA9145 RU-CE-Rev_E 18/06/2013
C. Воспроизводимость от партии к партии
Для определения воспроизводимости от партии к партии было изготовлено 3 партии
Bond Oracle HER2 IHC System в рамках 3 отдельных случаев и оценено на 24 секциях
грудной опухоли (24 ), взятых из четырех различных блоков ткани, фиксированной
формалином и пропитанных парафином (с интенсивностями окрашивания HER2 0, 1+,
2+ и 3+) и контрольных предметных стекол HER2 (12 контрольных точек данных). Было
выполнено три независимых серии в одной лаборатории в рамках трех отдельных
случаев, в каждом из которых использовалась отдельная производственная партия
Bond Oracle HER2 IHC System. Все предметные стекла были окрашены в Bond
Oracle HER2 IHC System с помощью полностью автоматизированной, улучшенной
системы окрашивания BOND. Окрашенные предметные стекла были замаскированы
и оценены в случайном порядке одним опытным наблюдателем для определения
воспроизводимости от партии к партии.
Анализ предметных стекол (исследования и контроль) из межсерийной проверки
точности показал, что удалось интерпретировать 36/36 результатов в исследуемых
точках. В 36 исследуемых точках не произошло никакого изменения окрашивания
между тремя разными производственными партиями Bond Oracle HER2 IHC
System. Окрашивание с помощью Bond Oracle HER2 IHC System одинаково у всех
производственных партий.
D. Межлабораторная воспроизводимость
Межлабораторная воспроизводимость Bond Oracle HER2 IHC System оценивалась в
3 местах – в Leica Biosystems Newcastle Ltd (Site A) и двух независимых лабораториях
(B и C) в общей сложности на 192 секциях, взятых из TMA и состоящих из 20 инвазивных
опухолей груди и 24 контрольных предметных стекол HER2. Из 192 окрашенных секций
TMA 96 были окрашены с помощью HER2 Primary Antibody и 96 – реактивом HER2
Negative Control. Все предметные стекла были окрашены в Bond Oracle HER2 IHC
System с помощью полностью автоматизированной, улучшенной системы окрашивания
BOND. Предметные стекла оценивались в 8 независимых сериях, выполненных в
каждом из трех мест исследования с использованием Bond Oracle HER2 IHC System из
одной и той же партии. Окрашенные предметные стекла были обесцвечены и оценены
в случайном порядке одним опытным наблюдателем в Leica Biosystems, Newcastle Ltd
для определения межлабораторной воспроизводимости.
Анализ предметных стекол из проверки межлабораторной воспроизводимости показал,
что удалось интерпретировать 1477/1920 (76,93%) результатов в исследуемых точках. 443
результатов в исследуемых точках не удалось интерпретировать по следующим причинам:
a) Неадекватные характеристики контрольного предметного стекла HER2 в 2/24
случаев, в результате 2 серий / 160 результатов в исследуемых точках были удалены.
Это произошло один раз в лаборатории A и один раз в лаборатории B (в каждой
лаборатории было удалено по 80 результатов в исследуемых точках).
b) Отклонение от плана исследований в лаборатории C, в котором после окрашивания
Bond Oracle HER2 IHC System было вручную контрокрашено гематоксилином в общей
сложности 24 предметного стекла. Это привело к избыточному контрокрашиванию и
контрольных предметных стекол HER2, и исследуемых точек TMA, вследствие чего
было удалено 240 исследуемых точек.
c) Потеря инвазивной опухоли с последующим удалением 23 исследуемых точек. Это
произошло в 23 случаях в лаборатории A и стало прямым следствием потери ткани в
блоке TMA при производстве 192 последовательных секций TMA, необходимых для
проведения этого исследования.
d) Не поддающееся интерпретации окрашивание из-за неправильного промывания в
полностью автоматизированной улучшенной системе окрашивания BOND вследствие
чего было удалено 20 исследуемых точек.
Оценка интерпретируемых предметных стекол в оценке межлабораторной точности
показала, что изменение окрашивания произошло в 79 случаях (5,28%) из 1477