Leica Biosystems HER2 FISH System - 30 Test - Инструкция (Страница 19)

Стр. 19 из 24
Pу
сский
Leica Biosystems Leica HER2 FISH System - 30 Test Инструкции по использованию TA9217 RU-CE-Rev_D 11/11/2013
Pу
сский
При исчислении предметных стекол, окрашенных при межлабораторной проверке
точности, 511/513 оцененных случаев показали конкордантный результат с общей
конкордантностью 99,61% с более низким 95% ДИ – 98,60%.
K. Межнаблюдательная проверка точности
Межнаблюдательная проверка точности была выполнена методом случайной
выборки. Воспроизводимость Leica HER2 FISH System - 30 Test у разных наблюдателей
оценивалась в трех лабораториях. В каждой лаборатории работало по одному
опытному наблюдателю. Для проверки было использовано 18 цельных случаев рака
груди, отражающие типы образцов, используемых в клинических исследованиях.
При исчислении предметных стекол, окрашенных при межнаблюдательной проверке
точности, 53/54 оцененных случаев показали конкордантный результат с общей
конкордантностью 98,15% с более низким 95% ДИ – 90,11%.
L. Проверка точности от партии к партии
Проверка точности от партии к партии была выполнена методом случайной выборки.
Точность от партии к партии определялась на трех партиях Leica HER2 FISH System
- 30 Test, независимо изготовленных с применением зарекомендовавших себя
технологий (GMP). Каждая партия испытывалась в одной лаборатории на 540 ранее
охарактеризованных образцах HER2 TMA со случаями рака груди, фиксированными
формалином и пропитанными парафином. Использование TMA для проверки
воспроизводимости между партиями позволило проверять большее количество
случаев с более широким диапазоном выраженности HER2 в разных партиях.
При исчислении предметных стекол, окрашенных при проверке точности от партии
к партии, 540/540 оцененных случаев показали конкордантный результат с общей
конкордантностью 100% с более низким 95% ДИ – 99,45%.
Надежность анализа
Надежность изучалась на системе Leica BOND-MAX и Leica BOND-III для определения
области допустимых значений времени и температуры извлечения тепла; времени,
температуры и концентрации извлечения энзимов; времени и температуры
денатурирования; времени и температуры гибридизации; времени и температуры
промывки. Надежность с использованием протокола системы Leica BOND-MAX и Leica
BOND-III по умолчанию также изучалась в выходом за рекомендуемые пределы по
температуре и влажности, указанные в директиве FDA/ORA ORA LAB5.3 Rev 1.7.
• При повышении температуры по умолчанию на каждом теплозависимом этапе на 4°C
или ее понижении на 4°C не наблюдалось никакого изменения усиления по сравнению
со стандартным протоколом Leica HER2 FISH System - 30 Test . Высочайшие уровни
качества наблюдались при стандартных температурах, и рекомендуются именно эти
температуры.
• При выполнении термического извлечения эпитопа (HIER) в течение 20 минут и
30 минут при 97 °C с Leica BOND ER1 не наблюдалось никаких изменений усиления
по сравнению со стандартным протоколом Leica HER2 FISH System - 30 Test.
Наивысшие уровни качества наблюдались в течение стандартного времени 25 минут, и
рекомендуется именно это время инкубации.
• При выполнении энзимного извлечения эпитопа (ЕIER) в течение 15 минут и 35 минут
при 37 °C не наблюдалось никаких изменений усиления по сравнению со стандартным
протоколом Leica HER2 FISH System - 30 Test. Наивысшие уровни качества
наблюдались в течение стандартного времени 25 минут, и рекомендуется именно это
время инкубации.
• При выполнении энзимного извлечения эпитопа (ЕIER) с соотношениями концентрата/
разбавителя энзимов 1:200 – 1:500 с использованием стандартного протокола Leica
HER2 FISH System - 30 Test не наблюдалось никаких изменений усиления. Наивысшие
уровни качества наблюдались при концентрации энзимов 1:300, и рекомендуется
именно эта концентрация.